基本信息中文名称[丙氨酸 ²⁸⁶]- 钙调蛋白依赖性蛋白激酶 II 片段 (281-302)三字母序列Met-His-Arg-Gln-Glu-Ala-Val-Asp-Cys-Leu-Lys-Lys-Phe-Asn-Ala-Arg-Arg-Lys-Leu-Lys-Gly-Ala单字母序列MHRQEAVDCLLKLFNARRKLLGA氨基酸数目22 个氨基酸无末端酰胺修饰分子式C111H191N39O29S2分子量2600.11结构式基本性质该多肽为 CaMKII钙调蛋白依赖性蛋白激酶 II281–302 区域片段286 位氨基酸突变为 Ala属于单点丙氨酸扫描突变肽。序列含 Met、Cys、Phe 残基Met 易氧化Cys 存在巯基容易发生二硫键交联样品保存时需注意抗氧化。多肽含有多个 Lys、Arg 碱性氨基酸整体呈强碱性水溶性较好产品形态为冻干粉末吸湿性较强。水溶液对蛋白酶敏感常温放置易降解稳定性较差。序列中的 Phe 可提供 280nm 紫外吸收方便 HPLC、UV 检测。作用机理CaMKII 是中枢神经系统非常关键的丝氨酸 / 苏氨酸蛋白激酶参与突触可塑性、学习记忆、神经元信号传导。281–302 区域位于 CaMKII 的自身抑制结构域正常状态下该片段结合激酶催化结构域抑制激酶活性当钙 - 钙调蛋白复合物结合后构象改变解除自抑制激活 CaMKII。 286 位突变为 Ala 会改变该多肽片段与 CaMKII 催化域之间的相互作用用来评估该位点残基对于自抑制结合、激酶活性调控的贡献。该多肽可以模拟 CaMKII 自身抑制区竞争性结合激酶活性位点抑制 CaMKII 磷酸化底物用于体外酶活实验。应用领域蛋白激酶构效关系研究丙氨酸扫描实验确定 286 位残基在 CaMKII 自抑制、分子内相互作用中的功能。CaMKII 酶活体外检测作为抑制肽用于激酶活性分析研究 CaMKII 底物结合与自抑制机制。神经信号通路研究研究突触可塑性、长时程增强 LTP 相关的 CaMKII 信号调控。蛋白 - 多肽相互作用实验SPR、ITC、Pull-down 等实验测定多肽和 CaMKII 催化结构域的结合亲和力。药物靶点筛选CaMKII 是神经退行性疾病、癫痫、慢性疼痛潜在靶点该多肽作为工具肽用于靶向抑制剂的体外筛选对照。药物研发CaMKII 过度激活和阿尔茨海默病、缺血性脑损伤、心律失常等疾病相关。该突变多肽本身不是药物候选分子仅作为科研工具肽。借助这类单点突变的自抑制片段科研人员解析 CaMKII 的结合口袋设计小分子抑制剂阻断 CaMKII 异常激活开发神经保护类候选药物。研究进展CaMKII 自抑制结构域多肽是研究该激酶自调控机制的经典工具。丙氨酸突变扫描是多肽领域常用手段逐个替换氨基酸为 Ala观察结合能力、抑制活性变化定位关键功能残基。281–302 片段是公认的自抑制核心区域[Ala²⁸⁶] 突变体常和野生型序列成对使用对比验证该位点是否为维持自抑制构象的关键残基大量体外生化实验采用该组多肽来阐明 CaMKII 激活的分子机制。储存规范干粉-20℃避光密封保存防潮尽量减少反复开盖含 Cys、Met环境氧气会造成氧化长期保存建议惰性气体保护。溶液使用无酶无氧缓冲液溶解分装单次使用小体积-80℃冻存严禁反复冻融。现配现用最佳避免巯基氧化形成二硫键聚合物。